Az üstökösvizsgálat (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE) egy érzékeny és gyors technika, amelyet elsősorban a DNS-károsodás kimutatására és az egyes sejtekben történő javításra használnak. A Comet Assay elnevezés az eredményekben megjelenő jellegzetes üstökösszerű alakzatból származik: a sejt magja alkotja a „fejet”, míg a sérült DNS-fragmensek vándorolnak, üstökösre emlékeztető „farkat” hozva létre.
Alapelv
A Comet Assay elve a DNS-fragmensek elektromos térben történő migrációján alapul. Az érintetlen DNS a sejtmagban marad, míg a sérült vagy töredezett DNS az anód felé vándorol, kialakítva az üstökös „farkát”. A farok hossza és intenzitása egyenesen arányos a DNS-károsodás mértékével.
Eljárás
- Sejt előkészítés: A vizsgálandó sejteket alacsony olvadáspontú agarózzal keverjük össze, és mikroszkóp tárgylemezekre kenjük, hogy egységes réteget képezzenek.
- Sejtlízis: A tárgylemezeket lízisoldatba merítik, hogy eltávolítsák a sejtmembránt és a nukleáris membránt, szabaddá téve a DNS-t.
- Elektroforézis: A tárgylemezeket elektroforézis kamrába helyezzük lúgos vagy semleges körülmények között. A sérült DNS-fragmensek az elektromos tér hatására a pozitív elektród felé vándorolnak.
- Festés: Az elektroforézis után a lemezeket fluoreszcens festékkel (pl. etidium-bromid) megfestjük, hogy láthatóvá tegyük a DNS-t.
- Mikroszkópos elemzés: Fluoreszcens mikroszkóp vagy speciális szoftver segítségével elemzik az üstökös alakját, és megmérik az olyan paramétereket, mint a farok hossza és intenzitása.
Kép a biorenderből
Adatelemzés
A Comet Assay eredményeit több kulcsparaméter alapján értékelik:
- Farok hossza: A DNS vándorlási távolságát jelzi, jelezve a DNS-károsodás mértékét.
- Farok DNS-tartalom: A farokba vándorló DNS százalékos aránya, gyakran használják a DNS-károsodás mennyiségi mérésére.
- Olive Tail Moment (OTM): Egyesíti a farok hosszát és a farok DNS-tartalmát, hogy átfogóbb mérést nyújtson a DNS-károsodásról.
Alkalmazások
- Genotoxicitási vizsgálatok: A Comet Assay-t széles körben használják a vegyszerek, gyógyszerek és sugárzás sejt-DNS-re gyakorolt hatásának felmérésére, így a genotoxicitás vizsgálatának kulcsfontosságú eszköze.
- Környezeti toxikológia: Segít a környezeti szennyező anyagoknak az élőlények DNS-ére gyakorolt hatásának elemzésében, betekintést nyújtva az ökoszisztémák biztonságába.
- Orvosi és klinikai kutatás: Az Comet Assay-t a DNS-javító mechanizmusok, a rák és más DNS-hez kapcsolódó betegségek tanulmányozására használják. Ezenkívül értékeli a rákterápiák, például a sugárterápia és a kemoterápia hatását a DNS-re.
- Élelmiszer- és mezőgazdasági tudományok: Peszticidek, élelmiszer-adalékanyagok és egyéb anyagok biztonságosságának felmérésére, valamint toxikus hatásuk állatmodelleken történő tanulmányozására használják.
Előnyök
- Magas érzékenység: Alacsony szintű DNS-károsodás kimutatására képes.
- Egyszerű működés: A technika egyszerű, így alkalmas nagy áteresztőképességű szűrésre.
- Széles körű alkalmazás: Különféle sejttípusokra alkalmazható, beleértve az állati és növényi sejteket is.
- Számszerűsítési kihívások: Bár a kvantitatív elemzés minőségi adatokat szolgáltat a DNS-károsodásról, nagymértékben támaszkodik a szoftver- és képelemzési technikákra.
- Kísérleti feltételek: Az eredményeket olyan tényezők befolyásolhatják, mint az elektroforézis ideje és a pH, ami megköveteli a kísérleti körülmények gondos ellenőrzését.
Korlátozások
A Comet Assay felbecsülhetetlen értékű eszköz az orvosbiológiai kutatásban, a környezettudományban és a gyógyszerfejlesztésben, köszönhetően rugalmasságának és nagy érzékenységének a DNS-károsodások kimutatásában és javításában. Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology)vízszintes elektroforézis kamrát kínál az üstökösvizsgálathoz. Üdvözöljük a kapcsolatot velünk, hogy megvitassák aComet Assayjegyzőkönyv.
A Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) több mint 50 éve specializálódott elektroforézis-műszerek gyártására saját professzionális műszaki csapatunkkal és K+F központunkkal. Megbízható és teljes gyártósorral rendelkezünk a tervezéstől az ellenőrzésig, és raktárral, valamint marketing támogatással. Fő termékeink az elektroforézis cella (tartály/kamra), elektroforézis tápegység, kék LED átvilágító, UV átvilágító, gélkép-elemző rendszer stb. Laboratóriumi eszközöket is szállítunk, mint például PCR műszer, örvénykeverő és laboratóriumi centrifuga.
Ha bármilyen vásárlási terve van termékeinkkel kapcsolatban, kérjük, ne habozzon kapcsolatba lépni velünk. Üzenetet küldhet nekünk e-mailben[e-mail védett]vagy[e-mail védett], vagy hívjon minket a +86 15810650221 telefonszámon, vagy adja hozzá a Whatsapp +86 15810650221 számot, vagy a Wechat: 15810650221 telefonszámot.
Kérjük, olvassa be a QR-kódot, hogy hozzáadja a Whatsapphoz vagy a WeChathoz.
Feladás időpontja: 2024.09.20