Bevezetés
A gélelektroforézis a molekuláris biológia egyik alapvető módszere, amelyet széles körben alkalmaznak fehérjék, nukleinsavak és más makromolekulák elválasztására. A minta térfogatának, feszültségének és elektroforézis idejének megfelelő szabályozása kulcsfontosságú a pontos és reprodukálható eredmények eléréséhez.Labor kollégánk ajánljalegjobb gyakorlatok ezeknek a paramétereknek az SDS-PAGE gélelektroforézis során történő kezeléséhez.
Peking Liuyi Biotechnology gél elektroforézis termékek
Minta mennyiség: Az összhang biztosítása
Az SDS-PAGE elektroforézis végrehajtásakor a minta térfogata kulcsfontosságú tényező, amely jelentősen befolyásolhatja az eredmények felbontását. Általában ajánlott 10 µL teljes fehérjét betölteni lyukonként. A konzisztencia biztosítása és a szomszédos lyukak közötti minta diffúzió megakadályozása érdekében fontos, hogy minden üres lyukba azonos térfogatú 1x töltőpuffert töltsön be. Ez az óvintézkedés segít megelőzni a minták átterjedését a szomszédos sávokba, ami akkor fordulhat elő, ha a kút üresen marad.
A minták betöltése előtt mindig kezdje azzal, hogy egy molekulatömeg-jelzőt ad egy lyukba. Ez lehetővé teszi a fehérje méretének könnyű azonosítását elektroforézis után.
Feszültségszabályozás: Kiegyenlítő sebesség és felbontás
Az elektroforézis során alkalmazott feszültség közvetlenül befolyásolja mind azt a sebességet, amellyel a minták vándorolnak a gélen keresztül, mind az elválasztás felbontását. Az SDS-PAGE esetében célszerű 80V körüli alacsony feszültséggel kezdeni. Ez a kezdeti alacsony feszültség lehetővé teszi a minták lassú és egyenletes vándorlását, és egy éles sávba koncentrálja őket, amikor belépnek az elválasztó gélbe.
Miután a minták teljesen bejutottak az elválasztógélbe, a feszültség 120 V-ra növelhető. Ez a magasabb feszültség felgyorsítja a migrációt, biztosítva a fehérjék hatékony elválasztását molekulatömegük szerint. Elengedhetetlen a brómfenolkék festékfront előrehaladásának figyelemmel kísérése, ami az elektroforézis befejezését jelzi. A 10-12%-os koncentrációjú géleknél jellemzően 80-90 perc elegendő; azonban a 15%-os géleknél előfordulhat, hogy kissé meg kell hosszabbítani a lefutási időt.
Időgazdálkodás: Tudni, mikor kell abbahagyni
Az időzítés egy másik kritikus tényező a gélelektroforézisben. A gél túl hosszú vagy túl rövid ideig tartó futtatása szuboptimális elválasztáshoz vezethet. A bróm-fenolkék festék migrációja hasznos indikátor: amikor eléri a gél alját, általában ideje leállítani a futtatást. A szabványos géleknél, például 10-12%-nál, általában körülbelül 80-90 perces elektroforézis időtartama elegendő. Nagyobb százalékos géleknél, például 15%-nál, a futtatási időt meg kell hosszabbítani a fehérjék teljes szétválása érdekében.
Pufferkezelés: Pufferek újrafelhasználása és előkészítése
Az elektroforézis puffer 1-2 alkalommal újrafelhasználható, a laboratórium sajátos körülményeitől függően. Az optimális eredmény érdekében azonban ajánlatos friss 10-szeres puffert készíteni, és közvetlenül felhasználás előtt hígítani. Ez biztosítja, hogy a puffer megőrizze hatékonyságát, ami megbízhatóbb elektroforézis eredményekhez vezet.
Peking Liuyi Biotechnology gél elektroforézis termékek
A minta térfogatának, feszültségének és elektroforézis idejének gondos szabályozásával jelentősen javíthatja a gélelektroforézis eredményeinek pontosságát és reprodukálhatóságát. Ha ezeket a bevált gyakorlatokat alkalmazza a laboratóriumi munkában, akkor tisztább és jobban megkülönböztethető sávok érhetők el, ami jobb adatokhoz vezet a későbbi elemzésekhez.
Ha több jó módszere van a gélelektroforézis kísérlet optimalizálására, szívesen megbeszéljük velünk!
A Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) több mint 50 éve specializálódott elektroforézis-műszerek gyártására saját professzionális műszaki csapatunkkal és K+F központunkkal. Megbízható és teljes gyártósorral rendelkezünk a tervezéstől az ellenőrzésig, és raktárral, valamint marketing támogatással. Fő termékeink az elektroforézis cella (tartály/kamra), elektroforézis tápegység, kék LED átvilágító, UV átvilágító, gélkép-elemző rendszer stb. Laboratóriumi eszközöket is szállítunk, mint például PCR műszer, örvénykeverő és laboratóriumi centrifuga.
Ha bármilyen vásárlási terve van termékeinkkel kapcsolatban, kérjük, ne habozzon kapcsolatba lépni velünk. Üzenetet küldhet nekünk e-mailben[e-mail védett]vagy[e-mail védett], vagy hívjon minket a +86 15810650221 telefonszámon, vagy adja hozzá a Whatsapp +86 15810650221 számot, vagy a Wechat: 15810650221 telefonszámot.
Kérjük, olvassa be a QR-kódot, hogy hozzáadja a Whatsapphoz vagy a WeChathoz.
Feladás időpontja: 2024. augusztus 20