A gélelektroforézis a molekuláris biológia egyik fő módszere a DNS elemzésére.Ez a módszer magában foglalja a DNS-fragmensek gélen történő migrációját, ahol méret vagy forma alapján szétválasztják őket.Azonban találkozott-e valaha bármilyen hibával az elektroforézises kísérletei során, például elkenődött csíkok az agaróz gélen, vagy nincsenek sávok a gélen?Mi lehet az oka ezeknek a hibáknak?
Szakembereink itt összefoglalták a hibaelhárítási műveleteket.
1. Az agaróz gélen elkent csíkok
●A DNS lebomlott.Kerülje el a nukleáz szennyeződést.
● Az elektroforézis puffer nem friss.Az elektroforézis puffer ismételt használata után az ionerősség csökken, a pH-értéke nő, így a pufferkapacitás gyengül, ami befolyásolja az elektroforézis hatását.Az elektroforézis puffer gyakori cseréje javasolt.
● Nem megfelelő elektroforéziskörülményeket alkalmaztak.A feszültség ne haladja meg a 20 V/cm-t, és az elektroforézis során tartsa a hőmérsékletet <30°C.Az óriás DNS-szál elektroforéziséhez a hőmérsékletnek <15°C-nak kell lennie. Ellenőrizze, hogy az elektroforézispuffer elegendő pufferkapacitással rendelkezik-e.
● Túl sok DNS került a gélbe.Csökkentse a DNS mennyiségét.
● Túl sok só a DNS-ben.Használjon etanolos kicsapást a felesleges sók eltávolításához.
● A DNS fehérjével szennyezett volt.Használjon fenolos extrakciót a fehérje eltávolítására haladó szinten.
● A DNS denaturálódott.Elektroforézis előtt ne melegítsen.Hígítsa fel a DNS-t pufferben 20 mM NaCl-dal.
2. Anomáliák DNS-sáv migráció
● A λHind III fragment COS helyének renaturációja.Az elektroforézis előtt melegítse a DNS-t 5 percig 65 °C-on, majd hűtse jégegységen 5 percig.
● Nem megfelelő elektroforéziskörülményeket alkalmaztak.A feszültség ne haladja meg a 20 V/cm-t, és az elektroforézis során tartsa a hőmérsékletet <30°C.Ellenőrizze, hogy az elektroforézis puffer elegendő pufferkapacitással rendelkezik.
● A DNS denaturálódott.Elektroforézis előtt ne melegítsen.Hígítsa fel a DNS-t pufferben 20 mM NaCl-dal.
3. Halvány vagy semmilyen DNS-sáv az agaróz gélen
● Nem elegendő mennyiségű vagy koncentrációjú DNS volt feltöltve a gélre.Növelje a DNS mennyiségét.A poliakrilamid gélelektroforézis valamivel érzékenyebb, mint az agaróz elektroforézis, és a mintaterhelés megfelelően csökkenthető.
● A DNS lebomlott.Kerülje el a nukleáz szennyeződést.
● A DNS-t elektroforetizáltuk a gélről.Elektroforizálja a gélt rövidebb ideig, használjon alacsonyabb feszültséget vagy magasabb százalékos gélt.
● Nem megfelelő W fényforrást használtunk az etidium-bromiddal festett DNS vizualizálására.Használjon rövid hullámhosszú (254 nm) W fényt a nagyobb érzékenység érdekében.
4. Hiányoznak a DNS-sávok
●A kis méretű DNS-t elektroforetizáljuk a gélről.Elektroforizálja a gélt rövidebb ideig, használjon alacsonyabb feszültséget vagy magasabb százalékos gélt.
● Nehéz megkülönböztetni a hasonló molekulájú DNS-sávokat.Növelje az elektroforézis idejét, és ellenőrizze a koncentrációta gélből, hogy megbizonyosodjon a gél megfelelő százalékos felhasználásáról.
● A DNS denaturálódott.Elektroforézis előtt ne melegítsen.Hígítsa fel a DNS-t pufferben 20 mM NaCl-dal.
● A DNS-szálak hatalmasak, és a hagyományos gélelektroforézis nem alkalmas.Elemzés impulzusgél elektroforézissel.Milyen egyéb problémái voltak az agaróz gél elektroforézissel?A jövőben többet fogunk kutatni az útmutatókért.
A Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotech) az elektroforézissel kapcsolatos termékekre összpontosító szakosodott vállalat Kínában.Története 1970-ben kezdődik, amikor Kína még nem lépett be a reformba és a nyitási időbe.A Liuyi Bitotech több éves fejlesztésnek köszönhetően saját márkával rendelkezik, amely Liuyi Brand néven ismert az elektroforézis termékek hazai piacán.
A Liuyi márka több mint 50 éves múltra tekint vissza Kínában, és a vállalat stabil és kiváló minőségű termékeket tud kínálni a világ minden táján.Évek óta tartó fejlesztésnek köszönhetően megérdemli a választást!
A Liuyi Biotech vízszintes elektroforézis cellái (tartályok/kamrák) kiváló minőségűek, jó megjelenésűek.A különböző méretű géltálcákkal megfelelnek az Ön különböző kísérleti követelményeinek.Saját műszaki csapatunk és gyárunk van.A tervezéstől a gyártásig, az alapanyagoktól a kulcsfontosságú alkatrészekig az egész folyamatot irányíthatjuk.A DYCP 31 sorozat DNS-elektroforézisre szolgál, amely modellDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, ésDYCP-31E.A különbség a gél méretében és árában van.Teljes méretű termékeket kínálunk vásárlóinknak.A modellDYCP-32Ca legnagyobb gélt 250 mm * 250 mm-es készítheti.
Eközben javasoljuk az elektroforézises tápegységünketDYY-6C,DYY-6DésDYY-10Celektroforézis celláinkhoz (tartályok/kamrák) DYCP-31 és 32 sorozat.
Ha további információra van szüksége a termékekről, kérjük, látogasson el erre a webhelyre, és vegye fel velünk a kapcsolatot e-mailben, hogy tudassa velünk, mit szeretne, és nézze meg, tudunk-e megoldást nyújtani az Ön számára.
Ha többet szeretne megtudni rólunk, kérjük, vegye fel velünk a kapcsolatot e-mailben[e-mail védett], [e-mail védett].
Feladás időpontja: 2022. május 09